鸡有益乳杆菌的分离鉴定

用乳杆菌选择培养基（ＬＳＣＭ）从鸡直肠内容物中分离出五株革兰氏阳性杆菌,分别是嗜酸乳杆菌２株（ＬＢ１、ＬＢ２）、唾液乳杆菌液亚种１株（ＬＢ３）、短乳杆菌１株（ＬＢ４）、发酵乳杆菌１株（ＬＢ５）。五株菌对雏鸡安全,对小白鼠无致病性。     

鸡肠源益生口乳杆菌的分离鉴定与生物学特性

从鸡肠中分离得到严格厌氧共生菌,筛选出适合禽类生产的益生菌株,探讨其益生性,为其应用奠定基础.通过采集鸡肠黏膜,特定厌氧培养基分离纯化肠道厌氧共生菌.根据抑菌活性筛选得到口乳杆菌,随后,对其进行生物学基本特性分析,包括生长曲线、酸耐受、胆盐耐受、溶血性、细胞毒性分析等.结果显示,口乳杆菌的对数生长期为24～60 h;对酸和胆盐有优良的耐受力;不具有多重耐药性;不具有溶血活性;对小鼠腹腔巨噬细胞细胞系Raw264.7没有细胞毒性;为后续微生态制剂以及抑菌物质研究提供了理论依据.     

鸡嗉囊内容物中乳杆菌的分离与鉴定

 对鸡嗉囊内容物中的乳杆菌进行调查.从11份样品中,共分离到41株乳杆菌,鉴定为10个种,其中唾液乳杆菌,卷曲乳杆菌,双发酵乳杆菌3个种占58%,确认为是鸡嗉囊内容物中的优势种群.     

破壁方法对短乳杆菌谷氨酸脱羧酶提取效果的影响

采用不同的破壁方法提取短乳杆菌谷氨酸脱羧酶（GAD）,研究破壁方法对所得GAD活力的影响。结果表明,超声波破壁有利于菌体释放胞内谷氨酸脱羧酶。正交试验结果表明,超声波破壁的最佳工艺条件为：超声功率220 W,工作时间20 min,工作/间歇时间比5 s/10 s。     

乳杆菌的分离及鉴定

从健康学龄儿童的新鲜粪便样品中分离得到6株乳杆菌,并对其进行属和种的鉴定。首先通过形态学观察及H2O2酶、糖发酵等生理生化试验对所分得菌株进行初步鉴定,然后利用16S rDNA序列同源性分析方法,对所分得菌株进行16S rDNA基因扩增与测序,测序结果与GenBank中该属内菌株的16S rDNA基因序列进行同源性分析,从而准确鉴定所分得菌株,并申请各菌株的GenBank登录号。经鉴定,其中1株为卷曲乳杆菌,2株为植物乳杆菌,1株为发酵乳杆菌,1株为黏液乳杆菌,1株为唾液乳杆菌。     

地衣芽胞杆菌对鸡呼吸系统黏膜免疫的影响

将162只1日龄健康麻羽肉用仔鸡随机分成3组,每组3个重复,每个重复18只,CK组饲喂基础日粮,A、B组在基础日粮中分别添加50 mg.kg-1地衣芽孢杆菌制剂、30 mg.kg-1杆菌肽锌,饲养期28 d,观察3组肉鸡肺、气管、初级支气管肥大细胞、浆细胞的数量,淋巴组织的分布及气管SIgA阳性细胞的数量,研究地衣芽胞杆菌对鸡呼吸系统黏膜免疫的影响.结果表明:A组肺、气管、初级支气管浆细胞及气管SIgA阳性细胞的数量显著多于CK组(P0.05),肥大细胞的数量显著低于CK组(P0.05),A、B组间肥大细胞、浆细胞的数量差异不显著(P0.05);A、B组均能增加肺、气管、初级支气管中淋巴组织的分布.可见,地衣芽孢杆菌对鸡呼吸系统的黏膜免疫有一定的促进作用.     

反刍动物源性的乳杆菌的分离鉴定

从健康荷斯坦奶牛的新鲜粪样筛选出一株优势菌(乳杆菌),对其进行生化试验鉴定和分子生物学鉴定,并做安全性试验。试验结果表明,此菌为革兰氏阳性菌,糖醇发酵试验为阳性,触媒试验阳性,对克拉霉素、洁霉素、青霉素、庆大霉素等有一定的耐药性,并能抑制大肠杆菌生长,但对沙门氏菌无抑制作用。动物试验结果表明,饲喂筛选出的乳杆菌的小鼠精神状态良好,粪便正常,没有出现腹泻和死亡,体质量明显增加。分离的反刍动物源性的乳杆菌为今后微生态制剂的研究奠定基础。     

水貂源乳杆菌及双歧杆菌的分离鉴定

取健康水貂粪便样经过处理后用MRS、TPY选择培养基进行筛选,筛选出主要优势菌为乳杆菌和双歧杆菌。对所筛选出的乳杆菌和双歧杆菌进行分离培养、生化试验鉴定和PCR鉴定。结果表明,乳杆菌和双歧杆菌为革兰氏阳性菌,糖醇发酵试验为阳性,并能抑制大肠杆菌生长,但对沙门氏菌无抑制作用。乳杆菌PCR鉴定中,在230 bp处有特异性条带,双歧杆菌在260 bp处有特异性条带。此试验为水貂专用微生态制剂的研制奠定了基础。     

乳品中乳杆菌的分离与鉴定

 乳杆菌在乳酸发酵工业和许多传统食品的制造上有很大意义.为认识和开发这一资源,笔者对云南省乳品中的乳杆菌进行了调查研究.从各种乳制品的88份样品中分离鉴定出29种,共217株乳杆菌,其中有8种乳杆菌尚未见到从乳品中分离鉴定的报道,本研究基本查清云南省乳品及其自然发酵剂中乳杆菌的种类,其中许多菌株产酸、产香等性能良好,有一定开发应用价值.     

锚定NDV HN蛋白重组干酪乳杆菌诱导雏鸡黏膜免疫应答

以干酪乳杆菌作为呈递抗原活载体,表达新城疫病毒保护性抗原HN蛋白。重组干酪乳杆菌表达外源蛋白后,经SDS-PAGE、Western blot及间接免疫荧光分析,表明目的蛋白表达并展示到乳酸菌表面。将重组菌及空质粒菌株分别滴鼻、点眼免疫雏鸡,于不同时间检测血清样品中特异性IgG;于三免后不同时间采集雏鸡的泪液、气管洗液、胆汁和肠洗液样品,采用间接ELISA方法检测样品的特异性sIgA;用MTT法检测免疫鸡脾淋巴细胞增殖情况,结果显示重组干酪乳杆菌表达系统能刺激动物黏膜免疫反应和系统免疫反应。     

乳酸菌对肠道黏膜免疫影响的研究进展

乳酸菌是人和动物体内最常见的原籍2群,其参与维系肠道内2群平衡,通过产生有机酸、细菌素等抗2物质抑制肠道内有害菌的生长.肠道上皮细胞可免疫识别定植在肠道内的乳酸菌及其片段,从而调节肠道黏膜免疫系统,促进淋巴细胞分化、提高sIgA的分泌、调节细胞因子的产生等,对动物机体的固有免疫和获得性免疫具有重要的影响.文章结合国内外研究结果,提出了乳酸2影响肠道免疫的4大前提条件,并从5个方面阐述了乳酸2对肠道黏膜免疫的影响.     

猪源罗伊氏乳杆菌 LR1 对断奶仔猪肠黏膜细胞外基质动态变化的影响

【目的】初步研究饲粮添加猪源罗伊氏乳杆菌对断奶仔猪肠道细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）表达的影响,为猪源罗伊氏乳杆菌在畜牧业中的推广应用提供参考。【方法】选取 21 日龄体重相近的杜长大杂交断奶仔猪 144 头,随机分为 3 个处理组,对照组（CON）饲喂基础饲粮,抗生素组（AO）在基础饲粮中添加 75 mg/kg 金霉素和 100 mg/kg 喹乙醇,罗伊氏乳杆菌组（LR1）在基础饲粮中添加 5×1010 CFU/kg 猪源罗伊氏乳杆菌 LR1,每个处理组各分 8 栏饲养,每栏 6 头猪,试验期为 42 d,饲养试验结束时随机从每栏挑选 1 头仔猪进行屠宰,取其十二指肠（近端）、空肠（中段）、回肠（远端）样品,进行肠道胶原蛋白、纤维黏连蛋白、肌腱蛋白及其相关调控因子等 ECM 相关指标的检测。【结果】Masson 染色观察结果显示,十二指肠、空肠和回肠中胶原纤维均由肠黏膜下层向上层延伸,与 CON 组相比,LR1 组和 AO 组断奶仔猪十二指肠的胶原容积分数均显著降低（P<0.05）,LR1 组的回肠胶原容积分数也显著降低（P<0.05）。TMT 高通量蛋白质组学分析结果显示,ECM-受体互作通路是差异蛋白主要富集通路之一,且其差异蛋白 COL1A2、COL4A2、COL6A1、ITGA1 等 ECM 分子的表达在 LR1 组显著低于 CON 组（P<0.05）。与 CON 组相比,LR1 组和 AO 组断奶仔猪空肠和回肠 COL1A2、COL3A1、ITGβ2 的基因表达均显著降低（P<0.05）,且 LR1 组显著降低了空肠 COL4A2、COL5A1、COL6A1、FN1、TNC、ITGα1 及回肠 ITGα1 的基因表达（P<0.05）,但对回肠 COL4A2、COL5A1、COL6A1、FN1、TNC 无显著影响。在回肠中,与 CON 组相比,LR1 组和 AO 组断奶仔猪回肠 Collagen Ⅰ ~ Ⅵ的含量显著降低（P<0.05）;LR1 组回肠胞内调控因子 SEC6A1、PDE4D 和胞外调控因子 MMP2 的基因表达均显著降低（P<0.05）;与 AO 组相比,LR1 组的胞内调控因子 SEC6A1、细胞因子 TGF-β 的基因表达显著降低（P<0.05）。【结论】饲粮中添加猪源罗伊氏乳杆菌 LR1 可通过减少 ECM 调控因子 SEC6A1、PDE4D 等的基因表达来调节断奶仔猪肠道 ECM 的重塑。     

单色光对肉雏鸡小肠黏膜形态结构的影响

 【目的】研究单色光对肉雏鸡小肠黏膜形态结构的影响,为阐明单色光影响肉雏鸡生长发育的作用机理提供形态学依据。【方法】采用LED（Light-emitting diodes）灯作为光源,选用刚出壳AA肉公雏120羽,随机分为4组,分别提供红（660 nm）、绿（560 nm）、蓝（480 nm）和白（400～700 nm）4种光源,每个处理设6个重复,每个重复5只,人工光照光强度均为15 lx,光照时间23 h,试验期7 d;分别于0、7 d时每个重复随机选取1只,利用组织化学染色方法及免疫组织化学方法检测肉鸡十二指肠、空肠、回肠的黏膜结构变化、杯状细胞数量以及空肠肠腺上皮细胞的增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。【结果】7日龄时,绿光组各项检测指标比其它光色组明显增高,与红光组相比,绿光组能够促进雏鸡空肠肠腺上皮细胞的增殖（115.5%,P＜0.05）,提高十二指肠、空肠和回肠绒毛上皮的杯状细胞数量（分别为71.8%,35.8%和27.2%,P＜0.05）,增加十二指肠、空肠和回肠绒毛高度（分别为207.9,93.9和63.9 μm,P＜0.05）,黏膜厚度（分别为262.2,184.6和185.6 μm,P＜0.05）以及绒毛高度/隐窝深度比值（分别为18.9%,54.5%和77.8%,P＜0.05）。【结论】在15 lx光强度下,肉鸡生长早期（0～7 d）选用绿光照明,可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构,提高小肠对营养物质的吸收能力,从而促进肉鸡生长发育。     

乳酸菌株植物乳杆菌和粪链球菌对肉鸡免疫性能的影响

将植物乳杆菌和粪链球菌2株乳酸菌分别添加到肉鸡饲料中,通过检测免疫器官指数、胸腺和脾脏的T细胞百分数、白细胞吞噬率、红细胞花环率、血清中新城疫(ND)血凝抑制(HI)抗体效价等指标,探讨了乳酸菌对肉鸡免疫性能的影响.结果表明,2株乳酸菌均能够促进肉鸡胸腺、脾脏和法氏囊的发育,增强白细胞的吞噬功能,增加胸腺和脾脏中的T细胞数,提高E-C3bR和E-ICR的花环形成率,以及提高机体产生ND疫苗HI抗体的水平.     

海带多糖对小鼠肠黏膜组织SIgA的影响

[目的]研究海带多糖对小鼠肠黏膜组织SIgA的影响。[方法]将40只昆明小鼠随机分为4组,分别以125、250、500μg/g的海带多糖灌胃小鼠15d,以灌胃蒸馏水小鼠为对照,取小肠黏膜,采用试剂盒法测小肠黏膜组织的Siva活性。[结果]250和500μg／g的海带多糖能够促进小鼠肠黏膜对SIgA的分泌量。[结论]海带多糖能够显著增强小鼠肠黏膜组织SIgA活性,并有随剂量增加活性增强的趋势。海带多糖对小鼠的免疫调节可能是通过肠道免疫系统发挥作用。     

MS糖对鸡源乳酸杆菌生物学特性的影响

[目的]为MS糖在饲料添加剂中的应用提供可靠的理论依据.[方法]从健康成年鸡肠道中分离乳酸杆菌,并进行生理生化指标测定,研究在体外培养条件下MS糖对鸡源乳酸杆菌生物学特性的影响.[结果]MS糖添加量3％～6％是乳酸杆菌生长最适的浓度范围.当MS糖添加量为4％时,乳酸杆菌产酸速率相对较快,产酸量有所提高,耐酸性和耐热性均显著增强.[结论]MS糖对乳酸杆菌的生物学特性有一定的影响,作为一种新型的功能性低聚糖在家禽饲养中具有广泛的开发前景.     

鸡源益生嗜酸乳杆菌分离及生物特性初探

从10日龄健康雏鸡的小肠中成功分离筛选出有抑菌作用的嗜酸乳杆菌M16.拮抗病原菌试验表明,该菌株的代谢产物在体外具有抑制杀灭鸡大肠埃希氏菌O-78、鸡白痢沙门氏菌O-79和金黄色葡萄球菌C58000的作用,是微生态制剂可选用的优良菌株.     

狼山鸡消化道乳酸菌的分离·鉴定以及生物学特性研究

[目的]分离和鉴定狼山鸡消化道乳酸菌,为开发新型禽用微生态制剂提供依据。[方法]利用厌氧菌分离技术,从狼山鸡肠道中分离乳酸菌,通过形态、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析对其进行鉴定,并对菌株进行耐酸性、抗菌活性等筛选。[结果]分离到5株乳酸菌LCr-01、LCr-02、LCe-01、LCe-02、LCe-03,经过生理生化试验、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析,初步鉴定植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌以及嗜酸乳杆菌。其中,LCr-02具有较强的耐酸性和抗菌活性。[结论]筛选到的5株菌乳杆菌中LCr-02具有较强的耐酸性与抗菌活性。     

新疆小芦苇青贮中乳酸杆菌的分离鉴定

[目的]筛选新疆小芦苇青贮中优良的乳酸杆菌.[方法]研究将从自制的新疆小芦苇青贮中分离出乳酸杆菌进行鉴定,对鉴定出的菌株进行产酸试验,确定新疆小芦苇青贮中的优势菌株.[结果]试验共分离得到了11株乳酸杆菌,根据<伯杰氏细菌鉴定手册>(第八版)中的种属表述结果,经鉴定2株(Hz2-1和Hz2-2)为戊糖乳杆菌(L. pentosus),2株(Hz3-1和Hz3-2)为植物乳杆菌(L.plantarum),2株(Zar2-8和Zar2-9)为牛粪乳杆菌(L.dung),2株(Zar8-3和Zar8-4)为短乳杆菌(L. brevis),3株(Gsr1-1、Hz1-1和Zar9-4)为德氏乳杆菌保加利亚亚种(L.delbrueckii subsp.bulgaricus).[结论]从不同菌株发酵产酸试验的结果来看,发现Hz2-1,Hz3-1具有较强的产酸能力,pH最低可达3.50,是新疆小芦苇青贮发酵过程中的主要产酸菌株.     

产类细菌素乳酸菌的筛选及培养条件优化

从紫花苜蓿青贮、牛奶及奶酪、酸菜中的分离到4株可产生类细菌素菌株,即戊糖乳杆菌（Lactobacilluspentosus）、植物乳酸菌（Lactobacillusplantarum）、戊糖片球菌（Pediococcuspentosaceus）、丙酸杆菌（Propionibacterium）。粗提4株细菌的发酵液对金黄色葡萄球菌有较强的抑制生长作用,对大肠杆菌的抑制作用较弱。4株分离菌类细菌素在80℃热处理15min后活性基本不变,100oC处理15min仍保持一定活性;在pH3～5范围内抑菌活性较强。胃蛋白酶、胰蛋白酶均可使该类细菌素完全失活;酸性蛋白酶不能使其失活。对分离株戊糖乳杆菌培养条件优化后,在30℃（pH值为6．0）条件下,选择碳氮质量分数为5％、碳氮质量比为3：2,添加MgS040．07g／100ml,MnSO4 0．05g／100ml,0．2ml／100mlTween-80有利于类细菌素的产生,抑菌直径可达18．2mm,是传统培养基配方抑菌效果的1．2倍。