禽流感血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。 1试验器材的质量控制     

鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用

鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据.     

禽流感血凝-血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝-血凝抑制试验是目前我国各地动物防疫监督机构、出入境检验检疫部门和养殖场对禽鸟进行禽流感疫苗抗体水平监测广泛采用的试验方法.     

水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨

2003年国家质量监督检验检疫总局出台了<高致病性禽流感诊断技术>(GB/T18936-2003)[1],标准中要求采用鸡红细胞作为血凝与血凝抑制试验的指示细胞监测禽流感抗体,这对于免疫鸡血清中的相应抗体水平监测比较合理[2-4],但对鸭、鹅及其他免疫禽类进行HI抗体水平监测时,常出现非特异性凝集现象[2-3],对检测结果的判定影响较大.有鉴于此,本试验拟对禽流感疫苗免疫后的水禽血清HI抗体检测方法进行探讨,研究适合免疫水禽禽流感HI抗体检测的方法.     

用鸽鸡红细胞进行禽流感血凝抑制试验的比较

分别用1％鸽红细胞和1％鸡红细胞,对经H5亚型禽流感疫苗免疫过的鹅、鸽、鸡的血清,按照不同血清处理方法,进行禽流感血凝抑制试验.结果表明,鸽红细胞作指示细胞,检测鸽免疫血清HI抗体效价效果优于鸡红细胞,但不适于检测鹅、鸡的免疫血清的HI抗体效价.     

血凝抑制试验影响因素分析

某些病毒(如禽流感病毒和新城疫病毒)能够与禽类的红细胞发生凝集,这种红细胞凝集现象可以被特异性免疫血清所抑制,即红细胞凝集抑制试验(HI).该方法是根据病毒的血凝蛋白具有识别并吸附于红细胞表面受体的生物学特性而建立起来的.由于血凝反应可被特异性抗体所抑制,抗体和病毒结合后,血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,所以血凝抑制试验可用于:发现与鉴定病毒;诊断病毒性疾病;监测机体血清抗体水平;为免疫程序制定提供准确基础数据,防止重复免疫、免疫失败和免疫空档的发生.该方法是一种在基层临床实践中极易推广的检验、检疫手段与诊断方法.目前在血凝抑制试验方面存在一些不规范操作问题,从而影响试验结果的准确性,导致不正确结果的出现.     

禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素分析

禽流感严重危害我国的养禽业,疫苗免疫是目前预防和控制禽流感发生的最有效手段,免疫后抗体水平的高低直接关系到实际的免疫效果,因而免疫抗体监测操作技术的准确性、有效性、可靠性对禽流感防控工作起着不可忽视的作用。禽流感免疫抗体水平监测一般采用血凝和血凝抑制试验(HA-HI试验),经济、操作简便和容易量化是该试验方法的优点,但影响试验结果的因素也较多,导致HA-HI试验结果失真,下面将就禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素浅析如下。     

异种家禽红细胞对禽流感抗体检测的影响

通过抗体监测及时掌握动物疫病流行规律和疫情动态,检测疫苗的免疫效果,从而完善免疫程序,提高畜禽对疫病的抵抗力,为有针对性地开展动物疫病预防控制工作,更有效防制各种传染病提供有力的保证。为及时掌握禽流感免疫效果,提高群体保护能力,严防高致病性禽流感疫情发生，血凝、血凝抑制试验被广泛地应用于检测各种家禽的禽流感抗体。笔者在检测过程中，     

不同剂型禽流感疫苗对蛋鸡免疫效果的分析与讨论

使用重组禽流感病毒灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对鸡禽流感进行免疫攻毒试验,通过血凝和血凝抑制(HI)试验技术检测机体内两种不同剂型疫苗的禽流感抗体水平,从中选出最佳免疫效果的疫苗。结果显示,禽流感病毒灭活疫苗优于禽流感-新城疫重组二联活疫苗,建议在防控禽流感时使用前者。     

血凝和血凝抑制试验常见问题浅解

正兽医实验室中,常利用血凝和血凝抑制试验,对禽流感、新城疫等具有血凝性的病毒进行鉴定或对发病禽群进行疫病诊断、对禽群的免疫状态进行评价等。1定义与原理1.1血凝某些病毒或病毒的血凝素,能选择性的使某种或某几种动物的红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝。1.2血凝抑制当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接反应,也称血凝抑制反应。     

禽流感血凝与血凝抑制试验的准确性与效率

面对我国养禽业禽流感疫苗的大面积使用，测定其免疫效果是经常性工作，而禽流感血凝与血凝抑制试验是我市各个区县每月所必做的，怎样作得更科学、更精准、效率更高就是值得探索的话题。时下报道关于“禽流感血凝与血凝抑制试验时的影响因素”的相关文章很多，众说纷纭。联系实际检测中遇到的问题，综合一下思路，避免出现一些误导很有必要。     

藏鸡禽流感抗体消长规律研究

为探讨鸡禽流感疫苗的免疫效果,总结禽流感病毒抗体在藏鸡体内的消长规律,制定最佳的鸡场禽流感免疫程序。对林芝市西藏农牧学院临床兽医楼养殖的86只藏鸡进行禽流感疫苗的免疫接种,并按程序完成三次免疫后每隔2周随机对接种过禽流感疫苗的20只藏鸡进行抗体检测,检测直至完成最后一次免疫后第28周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体数值,用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验检测抗体效价。血凝抑制实验表明,31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫,经2周后,抗体水平迅速上升,第10周抗体水平达到高水平并维持至第20周,直到第24周,抗体水平降至临界值4log2附近;ELISA试验表明,31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫,经2周后,抗体水平迅速上升,第10周至第20周,抗体水平达到高峰,持续保持在一定高水平。18周开始,抗体水平开始逐渐下降,直至第28周,抗体水平降至临界值50%附近。31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫第4～24周,血凝抑制实验结果表明检测所有藏鸡血清中抗体效价平均值都在标准值4log2以上,抽检合格率均大于标准值70%;ELISA试验结果表明抗体数值(PI)均在标准值50%以上。实验结果表明按本防疫程序防疫禽流感后,有效抗体在藏鸡体内维持时间为5个半自然月,建议第24周进行下一次免疫。     

影响血凝及血凝抑制试验结果因素的分析

血凝和血凝抑制试验是兽医实验室中进行动物疫病诊断和免疫监测最常用的试验方法之一,经常用到如鸡新城疫、禽流感、口蹄疫、猪瘟等多种疫病的检测试验中。石家庄市各级兽医实验室每年春防、秋防后对鸡新城疫、禽流感等主要动物疫病均进行免疫抗体集中监测,以便准确掌握免疫质量。因此血凝和血凝抑制试验对鸡新城疫等主要动物疫病的监测就显得尤为重要。但血凝和血凝抑制试     

西安市部分养鸡场AIV H5疫苗免疫后血清抗体监测与分析

为了解西安市养鸡场禽流感疫苗免疫后抗体产生情况,从西安市长安区、周至县、高陵县等区县父母代和商品代养鸡场采集血清2 626份,采用血凝试验和血凝抑制试验检测抗体滴度,经过检测,抗体合格率达84.3%;并对采集样品鸡群的免疫状况进行分类分析,结果表明免疫后3周~9周为抗体持续稳定期,10周后抗体水平开始下降;禽流感疫苗免疫2次~3次的鸡体内可产生较高水平的抗体。     

祛除禽流感HI试验中鹅血清非特异反应现象的研究

目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。     

不同禽红细胞对水禽禽流感血凝抑制试验结果的影响

禽流感是由正黏病毒科A型流感病毒引起的一种禽类烈性传染病,对养禽业及人类健康都会产生严重危害.对家禽进行禽流感疫苗预防接种是我国防治禽流感的主要措施之一.血凝和血凝抑制试验是监测家禽抗体水平、了解家禽免疫效果、建立合理免疫程序的有效方法,由于禽流感病毒具有凝集红细胞的特性,在禽流感血凝抑制试验中,采用鸡红细胞作为检测指示剂.在日常检测中,有许多水禽血清样品需要检测.为了解不同禽红细胞作指示剂对水禽禽流感血凝抑制试验结果的影响,进行了本次试验.……     

山东省日照市规模禽场禽流感免疫效果监测

为了解日照规模化禽场禽流感疫苗的免疫效果,应用血凝抑制试验方法对全市8家禽场的240份血清样品进行实验室检测。试验结果显示,禽流感抗体检测中,检测样品240份,免疫合格230份,抗体水平合格率达到95.8%,符合国家要求。     

禽流感H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)和禽流感-新城疫二联疫苗免疫抗体消长检测与分析

使用禽流感H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)和禽流感-新城疫二联疫苗对健康鸡进行免疫注射试验,通过血凝和血凝抑制(HI)试验技术检测疫苗免疫抗体消长,从中选择优质的疫苗,制定科学合理的免疫程序。结果显示:禽流感H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)抗体持续时间长,保护力强,优于禽流感-新城疫二联疫苗,建议在防控禽流感时使用前者。     

庄河市高致病性禽流感的抗体监测与免疫程序

高致病性禽流感(HPAI)是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的,不仅血清型多,而且自然界中带毒动物多,毒株易变异,防制困难大。为使我市高致病性禽流感得到有效控制,采用血凝与血凝抑制试验诊断技术方式,通过疫苗免疫对比试验     

瘟疫消散对禽流感H5N1亚型灭活苗免疫后抗体产生的影响

试验通过给21日龄不免疫鸡注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时每只鸡每天口服瘟疫消散0.5 g,分别于接种疫苗1,3,5,7,14,21天采血测抗体效价,与只用疫苗组相比较,现将结果报道如下。1材料及方法1.1试验动物21日龄不免疫鸡60只,由哈药集团黑龙江省生物制品一厂提供。1.2疫苗H5N1亚型禽流感灭活苗,哈尔滨兽医研究所生产,批号20050104。1.3试剂血凝抑制试验用H5N1亚型血清和血凝素,哈尔滨兽医研究所生产。1.4分组将60只鸡随机分成3组,每组20只。1.5疫苗接种Ⅰ组每只鸡颈部皮下注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时口服瘟疫消散颗粒;Ⅱ组…