| 非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及临床应用 |
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| 引用本文： | 张远龙,王超群,黄育浩,杜睿,李永福,王自强,李敏,张险朋.非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及临床应用[J].中国动物检疫,2023(10):87-94. |
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| 作者姓名： | 张远龙 王超群 黄育浩 杜睿 李永福 王自强 李敏 张险朋 |
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| 作者单位： | 1. 广东省动物疫病预防控制中心;2. 郑州海关技术中心;3. 东莞市动物疫病预防控制中心 |
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| 摘 要： | 为建立非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR方法,以非洲猪瘟病毒P72蛋白编码基因为靶基因设计引物和探针,利用正交试验方法优化反应体系及扩增程序,建立了非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR方法,并对其敏感性、特异性及稳定性进行评估。结果显示:建立的方法最低检出限为0.58 copies/μL,与荧光PCR方法相比更敏感;本方法与布鲁氏菌、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒无交叉反应;对10倍稀释的标准物质检测10次,变异系数为8.44%,重复性好。利用建立的方法对100份临床样品进行检测,结果均为阴性,与荧光PCR检测结果一致;对5份实验室间比对样品进行检测,检测出阳性样品4份,阴性样品1份,与实验室间比对给定的样品盘结果一致。结果表明,本研究建立的微滴式数字PCR方法的敏感性、特异性和稳定性符合要求,适于非洲猪瘟病毒临床检测。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 微滴式数字PCR 荧光PCR 临床应用 |
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