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宽口裂腹鱼中肾组织细胞系建立的初步研究
作者姓名:代金彩  聂竹兰  刘洁雅  洪继彪
作者单位:塔里木大学动物科学学院 新疆建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室 塔里木珍稀鱼类研究中心 新疆 阿拉尔 843300
摘    要:鱼类细胞培养是进行种质保存、基因功能分析、细胞工程育种等研究的重要材料和模型。为了建立濒危的宽口裂腹鱼(Schizothorax eurystomus)中肾组织细胞系,本研究以其中肾组织为材料,以组织块移植法启动细胞原代培养,待细胞稳定后再进行传代培养,建立宽口裂腹鱼中肾组织细胞系,命名为EUM10。分析宽口裂腹鱼中肾细胞系冻存复苏能力和最适生长条件,且通过PCR技术检验污染状况,用线粒体基因片段分析鉴定细胞的来源。结果显示,宽口裂腹鱼中肾组织细胞的最佳培养基为DME/F-12,最适温度为25℃,最适血清浓度为20%;细胞呈悬浮生长,生长曲线为“S”型曲线,第10代中肾组织细胞系细胞的群体倍增时间为23.26 h;第6代细胞液氮冷冻保存6个月后,复苏存活率达91.91%;经污染鉴定无污染现象;EUM10第10代细胞线粒体16S rRNA序列分析结果与宽口裂腹鱼基因序列一致性为99.81%,表明细胞系来自宽口裂腹鱼。本研究成功建立了宽口裂腹鱼中肾组织细胞系,可将宽口裂腹鱼中肾细胞系作为体外体系运用于宽口裂腹鱼的研究,如细胞遗传学、基因功能分析等,可为宽口裂腹鱼的基础研究和育种工作提供基础资料。

关 键 词:宽口裂腹鱼  中肾组织  细胞系  细胞培养
收稿时间:2020/5/12 0:00:00
修稿时间:2020/5/31 0:00:00

Preliminary study on the establishment of kidney tissue cell lines in Schizothorax eurystomus
Authors:DAI Jincai  NIE Zhulan  LIU Jiey  HONG Jibiao
Affiliation:College of Animal Science, Tarim University; Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science and Technology, Xinjiang Production and Construction, Alar, Xinjiang 843300, China
Abstract:
Keywords:Schizothorax eurystomus  Kidney tissue  Cell line  Cell culture
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