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苎麻BnbZIP1转录因子基因的克隆与表达特征分析
引用本文:周精华,揭雨成,邢虎成,钟英丽,余伟林.苎麻BnbZIP1转录因子基因的克隆与表达特征分析[J].中国农业科学,2013,46(7):1314-1322.
作者姓名:周精华  揭雨成  邢虎成  钟英丽  余伟林
作者单位:1.湖南农业大学苎麻研究所,长沙410128
2. 湖南省种质资源创新与资源利用重点实验室,长沙410128
3. 湖南农业大学生物科学与技术学院,长沙410128
基金项目:湖南省科技计划重点项目(2010TP4004-1,2010FJ2013,2012FJ4063)、国家科技支撑计划(2012BAD20B05-04)
摘    要:【目的】克隆苎麻转录因子基因BnbZIP1,分析其序列及表达特征,同时进行原核表达以及亚细胞定位分析。【方法】根据苎麻转录组测序中的Unigene48047片段序列,采用RT-PCR结合RACE技术克隆该基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用Real-time PCR分析该基因在不同组织和不同胁迫条件下表达特征;构建原核表达载体,进行原核表达;构建含EGFP的融合表达载体,观察其亚细胞定位情况。【结果】苎麻BnbZIP1的cDNA全长为2 071 bp,开放读码框为1 407 bp,编码468个氨基酸,推导该多肽的等电点和分子量为7.12和51.57 kD,与毛果杨(XP_002307972)的bZIP基因氨基酸序列的相似性最高,达到93%;IPTG诱导产生的重组蛋白相对分子量约为52 kD,与理论值一致;亚细胞定位分析表明其定位在细胞核中;荧光定量PCR分析表明,该基因在苎麻根、茎、茎尖、叶片、雌花和雄花中均有表达,其中,在雄花中表达最高,在根中表达最低,且该基因受ABA、干旱和高盐诱导上调表达。【结论】获得了BnbZIP1的全长cDNA序列,其编码蛋白具有植物bZIP转录因子典型的结构域,且该基因响应ABA、干旱和高盐逆境胁迫,预示该基因可能在植物抗逆反应中发挥着重要的调控作用。

关 键 词:苎麻    转录因子    bZIP    表达分析    亚细胞定位
收稿时间:2012-12-19
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