| 利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝SCR与SRK胞外域片段间的相互作用 |
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| 引用本文： | 杨红,朱利泉,张贺翠,杨永军,薛丽琰,杨昆,余浩,彭一波,罗兵,吴志刚,黄丹,高启国,王小佳.利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝SCR与SRK胞外域片段间的相互作用[J].中国农业科学,2011,44(9):1953-1962. |
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| 作者姓名： | 杨红 朱利泉 张贺翠 杨永军 薛丽琰 杨昆 余浩 彭一波 罗兵 吴志刚 黄丹 高启国 王小佳 |
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| 作者单位： | 1. 西南大学农学与生物科技学院,重庆,400716
2. 重庆市蔬菜重点实验室,重庆,400716 |
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| 摘 要： | 目的]利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝自交不亲和决定因子S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)与S位点受体激酶(SRK)胞外域(eSRK)片段间可能的相互作用区域.方法]以结球甘蓝B3为材料,利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为载体的全长SCRB3、SCRB3-1、SCRB3-2的重组诱饵质粒;以pGADT7为载体的全长eSRKB3、eSRKB3-1、eSRKB3-2的重组激活域(AD)质粒.用PEG/LiAc法将上述重组诱饵质粒转化感受态酵母菌Y2HGold,重组AD质粒转化感受态酵母菌Y187;Y2HGoldpGBKT7-SCRB3-s]、Y187pGADT7-eSRKB3-s]两两融合培养,观察交配菌在SD/-Trp-Leu/x-α-ga1/AbA(DDO/x/A)、SD/-Trp-Leu-Ade-His/x-α-gal/AbA(QDO/x/A)平板上的生长情况.结果]酵母双杂交重组表达载体构建成功,且无毒性和自激活作用产生;9个试验组中只有SCRb3-1、SCRb3-2与eSRKBb3-1、eSRKb3-2重组表达质粒转化子两两组合的4个融合株在QDO/x/A平板上出现蓝色克隆,激活了报告基因AUR1-C MEL1、HIS3、ADE2.结论]酵母双杂交系统适用于SCR与SRK蛋白相互作用的研究,初步确定了SCR与eSRK存在相互作用,SRK跨膜域的存在与否对其相互作用的研究没有影响.
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| 关 键 词： | 结球甘蓝 自交不亲和 S位点受体激酶（SRK） S位点富含半胱氨酸蛋白（SCR） 酵母双杂交 |
| 收稿时间： | 2010-12-30 |
Study on the Interactions Between the Truncated Fragments of SCR and eSRK from Brassica oleracea L.by a Yeast Two-Hybrid System |
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| YANG Hong,ZHU Li-quan,ZHANG He-cui,YANG Yong-jun,XUE Li-yan,YANG Kun,YU Hao,PENG Yi-bo,LUO Bing,WU Zhi-gang,HUANG Dan,GAO Qi-guo,WANG Xiao-jia.Study on the Interactions Between the Truncated Fragments of SCR and eSRK from Brassica oleracea L.by a Yeast Two-Hybrid System[J].Scientia Agricultura Sinica,2011,44(9):1953-1962. |
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| Authors: | YANG Hong ZHU Li-quan ZHANG He-cui YANG Yong-jun XUE Li-yan YANG Kun YU Hao PENG Yi-bo LUO Bing WU Zhi-gang HUANG Dan GAO Qi-guo WANG Xiao-jia |
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| Affiliation: | 1、College of Agronomy and Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400716;
2、Chongqing Key Laboratory of Olericulture, Chongqing 400716 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brassica oleracea L var capitata L self-incompatibility S-locus receptor kinase(SRK) S-locus cysteine-rich protein(SCR) yeast two-hybrid |
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