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奶山羊POU1F1基因CDs区的克隆、分析及原核表达
引用本文:李建华,罗军,张晓,樊睿,王伟,郝娟,赵旺生.奶山羊POU1F1基因CDs区的克隆、分析及原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(1):41-45.
作者姓名:李建华  罗军  张晓  樊睿  王伟  郝娟  赵旺生
作者单位:西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室;
基金项目:国家“863”高新技术研究与发展计划项目(2008AA10Z135); 国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(nyhyzx07-037)
摘    要:【目的】克隆奶山羊垂体特异性转录因子POU1F1基因CDs区,并对其进行生物信息学分析和原核表达。【方法】采集关中奶山羊垂体组织,提取其总RNA,根据绵羊POU1F1基因序列,利用反转录RT-PCR克隆POU1F1基因CDs区,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体pET-32a-POU1F1,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。【结果】关中奶山羊POU1F1基因(GenBank登陆号:FJ547813)开放读码框由876个碱基组成,编码291个氨基酸,基中包含1个POU-specific结构域(从第124~198个氨基酸)和1个Homeobox结构域(从第214~276个氨基酸);奶山羊POU1F1基因CDs区核苷酸序列与绵羊(NM_001009350)、牛(NM_174579)、人(NM_000306)和小鼠(NM_008849)的同源性分别为98%,97%,91%和86%,其氨基酸序列与绵羊、牛、人和小鼠的同源性分别为98%,98%,96%和92%;成功构建了重组质粒pET-32a-POU1F1的原核表达系统,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白His-POU1F1。【结论】POU1F1基因编码的功能氨基酸在奶山羊、绵羊、牛、人和小鼠上高度保守,推测奶山羊POU1F1基因与其他物种的POU1F1基因具有相似的功能。

关 键 词:关中奶山羊  POU1F1  克隆  生物信息学分析  原核表达
收稿时间:2009/5/12 0:00:00

Cloning and analysis of POU1F1 gene in dairy goat and its prokaryotic expression
LI Jian-hu,LUO Jun,ZHANG Xiao,FAN Rui,WANG Wei,HAO Juan and ZHAO Wang-sheng.Cloning and analysis of POU1F1 gene in dairy goat and its prokaryotic expression[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(1):41-45.
Authors:LI Jian-hu  LUO Jun  ZHANG Xiao  FAN Rui  WANG Wei  HAO Juan and ZHAO Wang-sheng
Affiliation:LI Jian-hua,LUO Jun,ZHANG Xiao,FAN Rui,WANG Wei,HAO Juan,ZHAO Wang-sheng(Key Laboratory for Molecule Biology of Agriculture,College of Animal Science , Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Guanzhong dairy goat  POU1F1  cloning  biological information analysis  prokaryotic expression  
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