| 石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白的表达及其生物学功能分析 |
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| 引用本文： | 肖贺贺,徐凤巧,刘明珠,苏美珍,余庆,李梦梦,李鹏飞.石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白的表达及其生物学功能分析[J].南方农业学报,2021,52(3):806-814. |
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| 作者姓名： | 肖贺贺 徐凤巧 刘明珠 苏美珍 余庆 李梦梦 李鹏飞 |
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| 作者单位： | 广西科学院/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖技术研究中心/广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室,南宁530007;上海海洋大学水产与生命学院/农业农村部淡水水产种质资源重点实验室,上海 201306;广西科学院/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖技术研究中心/广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室,南宁530007;北部湾大学海洋学院/广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室,广西钦州 535011;广西科学院/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖技术研究中心/广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室,南宁530007;河南师范大学生命科学学院,河南新乡 453007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（41706145）；广西重点研发计划项目（桂科AB18221111）；广西自然科学基金项目（2019GXNSFAA245054，AD19245022） |
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| 摘 要： | 【目的】明确石斑鱼虹彩病毒（Singapore grouper iridovirus，SGIV）主要衣壳蛋白（Major capsid protein，MCP）的生物学功能，为阐明SGIV感染致病机理及研发抗病毒产品提供理论依据。【方法】使用实时荧光定量PCR检测SGIV感染过程中MCP基因的转录时序及其在SGIV感染石斑鱼脾脏、肝脏、肾脏、肠道、胃和鳃组织中的表达水平；将SGIV MCP基因分别克隆至真核表达载体pEGFP-N3和pcDNA3.1上，构建重组质粒pEGFP-N3-MCP和pcDNA3.1-MCP，然后以重组质粒pEGFP-N3-MCP转染石斑鱼脾细胞（Grouper spleen cell，GS）进行亚细胞定位分析，同时以重组质粒pcDNA3.1-MCP转染胖头鲤细胞（Fathead minnow cells，FHM）构建能稳定表达MCP蛋白的FHM细胞系（FHM-MCP），用于分析MCP蛋白对宿主细胞生长增殖及SGIV感染压力下细胞存活率和病毒复制的影响。【结果】在SGIV感染8 h后即可检测到MCP基因的特异性转录，即MCP基因是一个晚期基因。在SGIV感染24 h后，MCP基因在石斑鱼脾脏中的相对表达量最高，其次是在肝脏、肾脏和肠道组织中，而在胃和鳃组织中的相对表达量较低，提示胃和鳃组织并非SGIV感染的主要靶器官。SGIV的MCP蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中。细胞生长增殖曲线和细胞计数结果均证实，MCP蛋白能调节细胞生长及促进细胞分裂增殖。在SGIV感染后24和48 h，FHM-MCP细胞的存活率均显著高于FHM-Vector细胞（真核表达载体pcDNA3.1转染FHM细胞），其存活率分别是FHM-Vector细胞的1.12和1.15倍。此外，FHM-MCP细胞在SGIV感染24和48 h后，其病毒滴度均高于FHM-Vector细胞，即MCP蛋白能促进SGIV病毒复制。【结论】SGIV的MCP基因是一个晚期基因，其编码蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中，通过促进宿主细胞分裂增殖及病毒复制，最终提高SGIV的病毒滴度和感染力。
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| 关 键 词： | 石斑鱼虹彩病毒(SGIV) 主要衣壳蛋白(MCP) 表达分析 亚细胞定位 宿主细胞 |
| 收稿时间： | 2020-07-27 |
Expression and biological functional analysis of major capsid protein(MCP) of Singapore grouper iridovirus |
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| XIAO He-he,XU Feng-qiao,LIU Ming-zhu,SU Mei-zhen,YU Qing,LI Meng-meng,LI Peng-fei.Expression and biological functional analysis of major capsid protein(MCP) of Singapore grouper iridovirus[J].Journal of Southern Agriculture,2021,52(3):806-814. |
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| Authors: | XIAO He-he XU Feng-qiao LIU Ming-zhu SU Mei-zhen YU Qing LI Meng-meng LI Peng-fei |
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