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山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究
引用本文:徐菁昱,刘艳芬,陈绍红,刘 铀.山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究[J].西北农业学报,2023(8):1151-1158.
作者姓名:徐菁昱  刘艳芬  陈绍红  刘 铀
作者单位:(1.广东海洋大学 滨海农业学院,广东湛江 524088;2.广东海洋大学 食品科技学院,广东湛江 524088)
基金项目:广东省南方现代草牧业产业体系(2019K127)。
摘    要:为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性,采用RT-PCR扩增雷州山羊α-干扰素基因,分析其核苷酸序列;采用PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列,构建原核表达载体pET- mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达;采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白rG-mIFN-α;通过细胞病变抑制法测定其抗小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GPV)活性。结果表明,雷州山羊α-干扰素全基因由570个核苷酸组成,编码189个氨基酸;与GenBank 上发表的山羊、林麝、弯角大羚羊、黄牛、瘤牛、绵羊、猪、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为99.8%、95.6%、96.8%、94.7%、94.7%、96.8%、81.6%、77.8%和70.0%;氨基酸序列同源性分别为100%、92.6%、94.7%、92.1%、93.2%、93.7%、67.9% 、61.6%和55.3%,提示反刍动物α-干扰素基因的核苷酸和氨基酸序列高度保守;rG-IFNα主要以包涵体形式存在,分子质量约32 ku;重组山羊α-干扰素能显著抑制PPRV和GPV感染引起的细胞病变,其抗PPRV和GPV效价分别为1.6×104 U/mg和1.35×104 U/mg。

关 键 词:雷州山羊  α-干扰素(IFN-α)  序列分析  原核表达  抗病毒活性

Effects of EMS Mutagenesis on Seed Germination of M0 Generation, Agronomic and Quality Traits of M3 Generation in Five Flax Varieties
XU Jingyu,LIU Yanfen,CHEN Shaohong and LIU You.Effects of EMS Mutagenesis on Seed Germination of M0 Generation, Agronomic and Quality Traits of M3 Generation in Five Flax Varieties[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2023(8):1151-1158.
Authors:XU Jingyu  LIU Yanfen  CHEN Shaohong and LIU You
Affiliation:(1.College of Coastal Agricultural Science of Guangdong Ocean University,Zhanjiang Guangdong 524088 China; 2.College of Food Science and Technology of Guangdong Ocean University,Zhanjiang Guangdong 524088 China)
Abstract:
Keywords:
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