| 广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体构建 及其相关生物信息学分析 |
| |
| 引用本文： | 黄叶,吴延军,朱思燃,奉玲丽,瞿秋红,江雨航,夏琴,崔悦悦,莫家远,兰干球.广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体构建 及其相关生物信息学分析[J].南方农业学报,2019,50(3). |
| |
| 作者姓名： | 黄叶 吴延军 朱思燃 奉玲丽 瞿秋红 江雨航 夏琴 崔悦悦 莫家远 兰干球 |
| |
| 作者单位： | 广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004;广西大学动物科学技术学院,南宁,530004 |
| |
| 基金项目： | 广西创新驱动发展专项项目 |
| |
| 摘 要： | 【目的】构建广西巴马小型猪结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体并鉴定其活性,为深入研究CTGF在癌症发生中的作用及其分子机制提供参考,也为构建CTGF转基因广西巴马小型猪及研发基于CTGF的癌症基因治疗策略提供理论依据。【方法】利用RT-PCR从广西巴马小型猪肝脏组织中克隆CTGF基因,并将CTGF基因亚克隆到p DsRed-N1载体上,然后通过脂质体转染小鼠Hep3B细胞,转染48 h后于荧光显微镜下观察细胞是否表达红色荧光蛋白,同时利用在线生物信息学软件对其理化性质进行分析。【结果】成功克隆获得广西巴马小型猪CTGF基因编码区(CDS)序列,序列全长1050 bp,共编码349个氨基酸,与NCBI上已公布普通猪参考序列的同源性为99.5%,有5处碱基突变,且均为同义突变。将广西巴马小型猪CTGF基因亚克隆到pDsRed-N1载体上成功构建了阅读框架正确的广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体,转染小鼠Hep3B细胞48 h后有红色荧光蛋白表达。广西巴马小型猪CTGF蛋白具有较强的亲水性,其二级结构中α-螺旋、β-折叠、延伸链和无规则卷曲各占13.18%、5.73%、17.48%和63.61%。【结论】广西巴马小型猪CTGF基因在进化过程中的保守性非常稳定,通过构建的真核表达载体能转染小鼠Hep3B细胞并成功表达,可用于生产转基因广西巴马小型猪及研发与CTGF基因有关的疾病模型。
|
| 关 键 词： | 广西巴马小型猪 CTGF基因 小鼠Hep3B细胞 脂质体转染 生物信息学 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
