| 重寄生真菌盾壳霉胞外蛋白酶产生条件及酶活影响因子 |
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| 引用本文： | 谢晓莉,杨龙,吴明德,张静,李国庆.重寄生真菌盾壳霉胞外蛋白酶产生条件及酶活影响因子[J].中国生物防治学报,2016(3):406-413. |
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| 作者姓名： | 谢晓莉 杨龙 吴明德 张静 李国庆 |
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| 作者单位： | 1. 作物病害监测与安全控制湖北省重点实验室/华中农业大学植物科学技术学院,武汉430070;西安市雁塔区食品药品监督管理局,西安710061;2. 作物病害监测与安全控制湖北省重点实验室/华中农业大学植物科学技术学院,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31471813;31000877)，高校博士点基金新教师基金(20100146120036) |
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| 摘 要： | 重寄生真菌盾壳霉Coniothyrium minitans是核盘菌Sclerotinia sclerotiorum的重要生防菌。为了探讨盾壳霉胞外蛋白酶在寄生核盘菌过程中的作用,采用明胶平板法对盾壳霉寄生核盘菌菌核产生的蛋白酶活性进行了检测,并进一步采用福林酚法定量测定蛋白酶活性,研究盾壳霉产生胞外蛋白酶的培养条件及影响蛋白酶活性的因子。试验结果表明,在被盾壳霉寄生的核盘菌菌核中检测到蛋白酶活性,表明蛋白酶可能参与盾壳霉重寄生作用。发现核盘菌菌核浸出液培养基适合盾壳霉产生胞外蛋白酶,摇培(20℃、200 r/min)5 d时蛋白酶活性最高,达到0.22 U/mL。盾壳霉胞外蛋白酶酶促反应的最适温度为60℃,最适pH 7.0。当温度不高于40℃时,蛋白酶酶活较稳定。5 mmol/L的金属离子Mg~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)、Cu~(2+)、Mn~(2+)、Li~+和K~+等对蛋白酶酶活没有显著影响(P0.05),而Fe~(2+)(5 mmol/L)显著(P0.05)提高了蛋白酶活性。盾壳霉蛋白酶对苯甲基磺酰氟(PMSF)敏感,说明盾壳霉产生的胞外蛋白酶可能主要是丝氨酸蛋白酶。这些结果为盾壳霉胞外蛋白酶的分离纯化和功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 盾壳霉 核盘菌 重寄生 蛋白酶 |
Culture Condition and Characterization of Factors Affecting Activity of the Extracellular Proteases Produced by Mycoparasite Coniothyrium minitans |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Coniothyrium minitans Sclerotinia sclerotiorum mycoparasite protease |
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