| 红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因克隆及RNAi载体构建 |
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| 引用本文： | 黄志鹏,赵艳红,明庭会,余明丽,冉珊敏,钱景华,周瑞阳,陈鹏.红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因克隆及RNAi载体构建[J].南方农业学报,2014,45(12):2110-2116. |
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| 作者姓名： | 黄志鹏 赵艳红 明庭会 余明丽 冉珊敏 钱景华 周瑞阳 陈鹏 |
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| 作者单位： | 广西大学植物遗传育种重点实验室,南宁530005广西农业科学院经济作物研究所,南宁530007广西大学植物遗传育种重点实验室,南宁,530005 |
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| 摘 要： | 目的]克隆红麻不育系和保持系6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因,并构建其RNAi载体,为进一步研究其在红麻花药发育中的功能奠定基础.方法]根据红麻花药转录组高通量测序数据结果和生物信息学方法获得6PDGH基因全长cDNA拼接序列,分别以红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)的花药反转录cDNA及总DNA为模板克隆红麻6PGDH基因全长.依据RNAi载体设计原则,选取红麻6PGDH基因cDNA序列中段389bp的特异片段做为RNA干扰片段,构建红麻6PGDH因的RNAi载体.结果]克隆获得的红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)花药6PGDH基因全长均为1751 bp,均包含1458bp的开放阅读框,编码485个氨基酸残基,无内含子;其碱基序列在不育系和保持系中仅存在两个碱基差异.该基因氨基酸序列(GenBank登录号KF964027)与拟南芥、玉米、大豆、苜蓿、三角叶杨、蓖麻的6PDGH同源性分别为75.07%、84.57%、86.50%、87.24%、91.19%和92.01%.成功构建了红麻6PGDH基因的RNAi载体,获得了干扰表达载体pART27-pKANNIBAL-R1+2.结论]成功克隆获得红麻6PGDH基因全长序列,构建的干扰表达载体可用于红麻6PGDH基因的功能研究.
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| 关 键 词： | 红麻花药 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 基因克隆 载体构建 |
6-phosphogluconate dehydrogenase(6PDGH) gene cloning of kenaf (Hibiscus cannabinus L.) and its RNA interference vector construction |
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