| 瓦氏雅罗鱼鳃细胞系的建立及其耐碱生长特性初探 |
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| 引用本文： | 徐悦,梁利群,孙博,常玉梅.瓦氏雅罗鱼鳃细胞系的建立及其耐碱生长特性初探[J].上海海洋大学学报,2023,32(2):283-291. |
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| 作者姓名： | 徐悦 梁利群 孙博 常玉梅 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学,中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（面上项目，重点项目，重大项目） |
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| 摘 要： | 瓦氏雅罗鱼（Leuciscus waleckii）作为盐碱水域中生存的自然优势种，是耐盐碱渗透压调节机制研究的理想模型。为进一步探究其耐盐碱离子调节机制，本研究采用胰蛋白酶消化法从中建立了鳃细胞系（LWG细胞系），并进行耐受实验以对其在盐碱生境中的生长特性进行论证，确定了该类细胞原代及传代培养的最优培育条件，意在构建耐盐碱适应条件下模式生物细胞系作为后续研究的稳定实验材料。结果表明：瓦氏雅罗鱼鳃细胞原代培养采用含有10% FBS(fetal bovine serum,胎牛血清)的DMEM培养基（Dulbecco''s modified eagle medium）可获得良好稳定的培养效果，细胞生长明显优于Leibovitz''s L-15培养基(Cell Culture Medium IscoveL-15)和MEM培养基(Minimum Eagle''s medium)；启动原代培养的36-72 h鳃细胞生长代谢旺盛；0.25%胰蛋白酶消化法适合瓦氏雅罗鱼鳃细胞的分离；鳃细胞增殖规律符合经典“S”生长曲线；现已证实，环境水域变化时鳃细胞将启动渗透压胁迫应答机制，以缓解盐碱离子对鱼体造成的损伤。本研究对LWG细胞系进行梯度耐受实验并检测其细胞活性和功能后发现：瓦氏雅罗鱼鳃细胞耐受时间为3 h，耐受浓度为25~50 mmol/L NaHCO3时为最佳条件；高浓度盐碱胁迫条件会导致细胞产生凋亡现象。LWG细胞可耐受25~50 mmol/L NaHCO3高浓度盐碱生境，且该生存条件对其功能及活性皆可产生一定程度上的影响。由此推断，LWG细胞具有较强的盐碱渗透压耐受性，该细胞系的建立将有利于对瓦氏雅罗鱼耐盐碱机制的研究深入至细胞学领域，并对其盐碱胁迫渗透压应答机制和相关基因功能的研究提供实验材料。
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| 关 键 词： | 瓦氏雅罗鱼、鳃细胞系、原代培养、耐盐碱、渗透压应答机制 |
| 收稿时间： | 2021/4/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/2/3 0:00:00 |
Establishment of the gill cell line of Leuciscus waleckii and alkaline-tolerant growth characteristics |
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| XU Yue,LIANG Liqun,SUN Bo,CHANG Yumei.Establishment of the gill cell line of Leuciscus waleckii and alkaline-tolerant growth characteristics[J].Journal of Shanghai Ocean University,2023,32(2):283-291. |
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| Authors: | XU Yue LIANG Liqun SUN Bo CHANG Yumei |
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| Affiliation: | National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, Heilongjiang, China |
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| Keywords: | Leuciscus waleckii gill cell line primary culture salt-resistant alkali osmotic pressure response mechanism |
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