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| 猪IL-10 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 朱希旺,杜以军,李俊,陈智,于江,张玉玉,夏焱春,周明明,王金宝.猪IL-10 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测方法的建立[J].家畜生态学报,2014,35(8). |
| 作者姓名： | 朱希旺 杜以军 李俊 陈智 于江 张玉玉 夏焱春 周明明 王金宝 |
| 作者单位： | 1. 山东大学生命科学学院,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100 2. 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100 3. 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南,250100 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，山东省现代农业产业技术体系 |
| 摘 要： | 白介素-10(IL-10)是一种具有免疫抑制作用的多能细胞因子.能够引发猪免疫抑制效应的多种病毒在感染宿主时均伴随有明显的IL-10上调,其中就包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),然而并不是所有的PRRSV毒株都能上调IL-10.为了详细探讨PRRSV免疫抑制与IL-10上调之间的关系以及PRRSV感染上调IL 10的具体分子机制,本研究针对猪IL-10以及看家基因β actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建了各自含有IL-10、βactin引物扩增序列的重组质粒为阳性标准品,建立了以2△△ct为基础的SYBR GreenⅠrealtime PCR检测方法.该方法线性关系良好;敏感性高,两种基因的检测下限均为1×101 copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性良好,批内变异系数小于2％,批间变异系数小于3％;目的基因及内参基因的扩增效率较高,分别为92.7％、97.8％.综上所述,该方法可以用于猪IL-10 mRNA水平的表达分析. |
| 关 键 词： | 猪 白介素-10 PRRSV 免疫抑制 Real-time PCR |
Establishment of SYBR Green Ⅰ-based Realative Quantative Real-time PCR for Porcine IL-10 Detection |
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| Abstract: | |
| Keywords: | porcine IL-10 PRRSV immunosuppression real-time PCR |
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