蓝舌病1型病毒VP7蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.01.033

《中国畜牧兽医》 ›› 2017, Vol. 44 ›› Issue (1): 236-241.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.01.033

蓝舌病1型病毒VP7蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析

熊和丽¹, 李国华², 王金萍¹, 苗海生¹, 宋建领¹, 李华春¹

1. 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室, 昆明 650224;
2. 墨江县动物疫病预防控制中心, 墨江 654800

收稿日期:2016-06-29 出版日期:2017-01-20 发布日期:2017-01-19
通讯作者: 宋建领, 李华春 E-mail:jianling_song@hotmail.com;li_huachun@hotmail.com
作者简介:熊和丽(1981-),女,四川仁寿人,硕士,研究方向:动物病毒学,E-mail:helihewei@163.com
基金资助:
国家自然科学基金（31260612）；公益性行业（农业）科研专项（201303035）

Epitope Mapping and Immuno-detection of VP7 Protein of Bluetongue Virus Serotype 1

XIONG He-li¹, LI Guo-hua², WANG Jin-ping¹, MIAO Hai-sheng¹, SONG Jian-ling¹, LI Hua-chun¹

1. Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory, Kunming 650224, China;
2. The Animal Health Inspection of Mojiang Country, Mojiang 654800, China

Received:2016-06-29 Online:2017-01-20 Published:2017-01-19

摘要/Abstract

摘要：

为研究蓝舌病1型病毒VP7蛋白关键性氨基酸表位定位，本试验应用抗蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体淘选噬菌体展示的7肽随机肽库，对筛选的共有序列噬菌体扩增纯化，通过ELISA、竞争性ELISA分析共有噬菌体拟位与蓝舌1型病毒VP7蛋白单克隆抗体的免疫反应性。结果表明，含有LNWPMVR基序的噬菌体拟位能够与蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体发生特异性结合，并且此结合能被蓝舌病1型病毒抑制或阻断，表明噬菌体7肽模拟了BTV蛋白上与蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体结合的抗原决定簇，提示蓝舌病病毒VP7蛋白的第163-189位氨基酸（LNAGARGDVQQIFQGRNDPMMIYLVWR）构成蓝舌病病毒VP7蛋白特异性表位。

关键词: 蓝舌病病毒; VP7蛋白; 表位

Abstract:

In this study,in order to map the key amino epitope of VP7 protein of blue tongue virus serotype 1 (BTV1),we used monoclonal antibody against VP7 protein of BTV1 to screen 7 mer phage display random peptide library. The selected phages including VP7 protein consensus sequence were amplified and purified,immunoreactivity between epitope of selected phages and monoclonal antibody against VP7 of BTV1 was analyzed by ELISA and competitive ELISA (c-ELISA).The result showed that the epitope of phages including LNWPMVR sequence could specially combine monoclonal antibody against VP7 of BTV1,and the combination could be inhibited or blocked by BTV1,it demonstrated that 7 mer phage simulated the antigenic determinant of BTV protein which could combine monoclonal antibody against VP7 of BTV1.The results suggested that the amino acides 163 to 189(LNAGARGDVQQIFQGRNDPMMLYLVWR) were the specific epitope of VP7 protein of BTV.

Key words: bluetongue virus; VP7 protein; epitope

中图分类号:

S852.65

熊和丽, 李国华, 王金萍, 苗海生, 宋建领, 李华春. 蓝舌病1型病毒VP7蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(1): 236-241.

XIONG He-li, LI Guo-hua, WANG Jin-ping, MIAO Hai-sheng, SONG Jian-ling, LI Hua-chun. Epitope Mapping and Immuno-detection of VP7 Protein of Bluetongue Virus Serotype 1[J]. , 2017, 44(1): 236-241.

参考文献

[1] Perez de Diego A C, Athmaram T N, Stewart M, et al. Pharacterization of protection afforded by a bivalent virus-like particle vaccine against bluetongue virus serotypes 1 and 4 in sheep[J].PLoS One,2011,6(10):e26666.
[2] 张念祖,李志华,张开礼,等. 中国蓝舌病发现历史、病毒分离及血清学研究[A]. 第一届东南亚太平洋地区蓝舌病毒学术研讨会论文汇编[C].昆明:1995:4-9.
[3] Matsuo E, Roy P. Minimum requirements for bluetongue virus primary replication in vivo[J].J Virol,2013,87(2):882-889.
[4] Belhouchet M, Mohd Jaafar F, Firth A E,et al. Detection of a fourth orbivirus non-structural protein[J].PLoS One,2011, 6(10):e25697.
[5] Yu Y, Fukusho A, Ritter D G, et al. Complete nucleotide sequence of the group-reactive antigen VP7 gene of bluetongue virus[J].Nucleic Acids Res, 1988, 16(4):1620.
[6] Hosamani M, Shimizu S, Hirota J, et al. Expression and characterization of bluetongue virus serotype 21 VP7 antigen:C-terminal truncated protein has significantly reduced antigenicity[J].J Vet Med Sci, 2011, 73(5):609-613.
[7] 熊和丽, 宋建领, 王金萍, 等. 应用噬菌体展示7肽文库技术进行蓝舌病1型病毒VP2蛋白表(拟)位分析[J]. 中国预防兽医学报,2015,37(10):786-789.
[8] Hofmann M A, Renzullo S, Mader M,et al. Genetic characterization of toggenburg orbivirus, a new bluetongue virus, from goats, Switzerland[J]. Emerg Infect Dis,2008,14(12):1855-1861.
[9] Maan S, Maan N S, Nomikouet K, et al. Novel bluetongue virus serotype from Kuwait[J].Emerg Infect Dis,2011,17(5):886-889.
[10] Jenckel M, Breard E, Schulz C, et al. Complete coding genome sequence of putative novel bluetongue virus serotype 27[J].Genome Announcements,2015, 3(2):e00016-15.
[11] Maan S, Maan N, Nomikou K, et al. Complete genome characterization of a novel 26th bluetongue virus serotype from Kuwait[J].PLoS One,2011, 6(10):e26147.
[12] Coetzee P, Stokstad M, venter E H, et al. Bluetongue:A historical and epidemiological perspective with the emphasis on South Africa[J].Virol J,2012, 9:198.
[13] Huismans H, Erasmus B J. Identification of the serotypespecific and group specific antigens of bluetongue virus[J].Onderstepoort J Vet Res,1983,48(2):51-58.
[14] Grimes J, Basak A K, Roy P, et al. The crystal structure of bluetongue virus VP7[J].Nature, 1995, 373(6510):167-170.
[15] 魏天, 徐青元, 耿宏伟, 等. 蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定[J]. 中国预防兽医学报,2014,36(1):63-66.
[16] 耿宏伟, 秦永丽, 李俊平, 等. 蓝舌病病毒重组VP7蛋白单克隆抗体制备及竞争ELISA检测方法的建立[J]. 中国预防兽医学报,2012,34(5):388-392.
[17] 杜杰, 尹慧琼, 杨姝, 等.蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位预测[J]. 中国动物传染病学报,2013,21(1):29-36.
[18] 宋建领,张文东,张富强,等. 禽流感病毒M1蛋白型特异性表位分析[J]. 中国人兽共患病学报,2008,24(7):626-630.
[19] 张富强, 李志华, 张念祖. CSFV囊膜蛋白E2单克隆抗体识别表(拟)位基序的差异性分析[J]. 中国预防兽医学报, 2005, 27(5):373-379.

蓝舌病1型病毒VP7蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析

Epitope Mapping and Immuno-detection of VP7 Protein of Bluetongue Virus Serotype 1

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[1]	张国庆, 姜宇航, 张爽, 李乐天, 郝嘉翼, 陈竞, 邹万成, 李昌, 李太元, 高旭, 金宁一. 猪δ冠状病毒RBD蛋白多肽抗体的制备与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1575-1583.
[2]	张婧旭, 徐玉, 梁海英, 曾智勇, 汤德元, 王彬, 徐松平, 万娟, 祝羊. 伪狂犬病病毒贵州分离株与疫苗株遗传进化和抗原表位分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1093-1106.
[3]	周文锋, 张英婕, 白一涵, 张露华, 麦金辉, 王乃东, 杨毅, 湛洋, 王东亮. 猪圆环病毒2型全基因组序列分析及Cap蛋白CTL表位预测[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 656-665.
[4]	徐娅玲, 张霁辉, 牛熙, 李升, 黄世会, 冉雪琴, 王嘉福. 非洲猪瘟病毒P72蛋白合成肽疫苗的构建及其免疫效力评估[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(8): 3083-3090.
[5]	李世念, 刘婉宁, 陈亚萍, 王金涛. 基于免疫信息学方法设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒S、M及E蛋白的多表位疫苗[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1057-1066.
[6]	莫红芳, 揭凯, 陈鑫, 文威, 刘文强, 陈焕春, 钱平, 李祥敏. 猪塞尼卡谷病毒单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 307-317.
[7]	潘晨浩, 张欣, 赵瑞利, 姜轩, 金天明, 于恩远, 李留安, 曾君, 于晓雪, 宋淇淇, 胡烨. 猪链球菌重组靶向表位蛋白DCpep-GSE的构建及细胞毒性检测[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(8): 2990-3001.
[8]	李占鸿, 宋子昂, 肖雷, 朱建波, 杨振兴, 李卓然, 廖德芳, 李华春, 杨恒. 流行性出血病病毒VP7蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1405-1413.
[9]	苗海生, 寇美玲, 谢佳芮, 李乐, 李华春. 感染16型蓝舌病病毒后绵羊部分细胞因子消长特点研究[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(1): 296-302.
[10]	孙正楠, 张焕容. 羊口疮病毒B2L蛋白抗原表位预测及重组蛋白设计与验证[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(3): 686-695.
[11]	杨振兴, 寇美玲, 廖德芳, 高翔, 胡忠燕, 李占鸿, 谢佳芮, 李华春, 杨恒. 2019年云南省景洪市哨兵动物多种虫媒病毒的分离鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(12): 4127-4137.
[12]	杨亚军, 何金科, 白天鸽, 宋胜男, 杨宁宁, 陈创夫, 王震. 奶牛妊娠相关糖蛋白2的表达及结构功能预测分析[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(10): 3039-3048.
[13]	何金科, 杨亚军, 邓肖玉, 何延华, 张超, 马忠臣, 王勇, 陈创夫. 牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白的生物信息学分析及多表位筛选[J]. 中国畜牧兽医, 2019, 46(12): 3475-3485.
[14]	吴阳开, 范文胜, 张雪莲, 李智丽, 郭锦玥, 李文锋, 黄淑坚. 新型鸭呼肠孤病毒QY株σB蛋白基因特征、二级结构预测及其细胞抗原表位分析[J]. 中国畜牧兽医, 2019, 46(10): 2851-2859.
[15]	孙正楠, 毛从剑, 张焕容. 山羊口疮病毒四川分离株F1L基因分子特征分析及抗原表位预测[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(7): 1942-1948.